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新品上市 | 耐高盐全能核酸酶DENARASE® High Salt


DENARASE® High Salt 是一种经过生物工程改造的野生型 Serratia marcescens 内切酶,通常用于生物工艺中的 DNA 去除。与野生型 DENARASE® 相比,该酶的几个氨基酸被替换以提高其耐盐性,而不会失去其对核酸的特异性。DENARASE® High Salt 在更广泛的盐浓度和 pH 范围内保持更高的活性,为客户提供了更大的工艺灵活性,同时为病毒载体制造工艺提升成本效益,尤其是在需要较高盐浓度的条件下由于与野生型核酸内切酶具有很高的相似性,DENARASE® High Salt 可以使用与野生型酶相同的核酸内切酶 ELISA试剂盒进行检测,例如DENARASE® ELISA试剂盒Cygnus核酸内切酶残留检测试剂盒(EonucleaseGTP ELISA货号F960

 

DENARASE® High Salt的生产采用c-LEcta成熟的专利DENARASE®生产工艺,该工艺采用革兰氏阳性芽孢杆菌菌株Bacillus.sp.表达大大降低了内毒素残留风险。该酶按照ISO 9001标准生产,不使用抗生素和动物源性原料或TSE/BSE风险原料。

 

DENARASE® High Salt酶特性

DENARASE® High Salt是专为在更高、与工艺相关的盐浓度下实现DNA清除活性而设计的。该工程酶在0-500 mM一价阳离子浓度范围内具有活性(见图1)。

https://denarase.c-lecta.com/hs-fs/hubfs/Effect%20of%20Naci.png?width=2000&name=Effect%20of%20Naci.png

1. NaCl对酶活性影响

 

镁离子(Mg2+)是确保DENARASE® High Salt发挥酶活性所必需的辅因子。DENARASE® High Salt低镁离子浓度(5-25 mM Mg2+)下具有基本活性,但在高镁离子浓度(>25 mM Mg2+)下酶活性会降低。因此,在使用DENARASE® High Salt时,应确保镁离子浓度在适当范围内(见图2)。

https://denarase.c-lecta.com/hs-fs/hubfs/Effect%20of%20Magnesium.png?width=2000&name=Effect%20of%20Magnesium.png

图2. Mg2+对酶活性影响

 

 

DENARASE® High Salt质量参数

DENARASE® High Salt产品为液体形式,配方为20 mM Tris-HClpH 7.4±0.2)、250 mM NaCl5 mM MgCl250%(体积比)甘油。

项目

方法

质量标准

产品性状

直接观测

澄清透明液体

酶活性

光学测定1

>250 U/µL

纯度

SDS-PAGE和银染

≥ 99%

比活性

光学测定单位蛋白具有的酶活性即280 nm下44,600 L x mol-1 x cm-1的摩尔消光系数

>5 x 105 U/mg

内毒素

LAL-Test,参考 Ph. Eur. 2.6.14, 方法C

<0.25 EU/kU

总菌落数

TAMC/TYMC 参照 Ph. Eur. 2.6.12

需氧菌: < 5 cfu/200 µL

酵母: < 5 cfu/200 µL

1. Unit定义: 每个活性单位 (U) 指在37 °C ,pH 8.0 条件下,30分钟内将鲑鱼精DNA消化至相当于ΔA260nm值为1.0 的酸溶性寡聚核苷酸。

 

DENARASE® High Salt产品参数


  • 分子量: 27 kDa
  • 最适pH: pH 7.4 - 9.0
  • 最适反应温度:37 °C
  • 等电点(pI)7.831
  • 辅因子:Mg2+


 

DENARASE® High Salt订购信息

品名

货号

规格

DENARASE High Salt 25 kU

22002-25k

25 kU

DENARASE High Salt 100 kU

22002-100k

100 kU

DENARASE High Salt 500 kU

22002-500k

500 kU

DENARASE High Salt 1000 kU

22002-1000k

1000 kU

DENARASE High Salt 5000 kU

22002-5000k

5000 kU

 


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